지방세포에서의 eotaxin 발현과 고지방 식이 유도 비만 쥐에서의 절식의 효과
The Expression of Eotaxin in 3T3-L1 Adipocytes and the Effects of Weight Loss in High-fat Diet Induced Obese Mice
- 주제(키워드) 초등교육 , 환경의사 결정 , 청지기적 환경관
- 발행기관 한동대학교 교육대학원
- 지도교수 이국운
- 발행년도 2011
- 학위수여년월 2011. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 교육대학원 일반사회교육전공
- 세부전공 일반사회교육
- 원문페이지 v, 84p.
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/handong/000001103804
- 본문언어 한국어
- 저작권 한동대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
Eotaxin은 호산구의 화학주성 및 활성화와 관계된 CC chemokine으로 천식에서 중요한 역할을 한다. 최근 비만이 천식의 발병률 증가와 관계가 있는 것으로 고려되고 있으나, 비만과 eotaxin 발현의 관계는 비만인 쥐와 사람에게서만 일부 연구된 실정이다. 따라서 우리는 3T3-L1 지방전구세포와 지방세포에서의 eotaxin 발현 변화, 그리고 식이유도 비만 쥐에서의 체중 증감이 eotaxin 발현에 미치는 영향에 대하여 살펴보았다. 먼저 3T3-L1 지방세포 차원에서 eotaxin 발현 변화를 확인하기 위해 지방세포 분화 과정을 살펴보았고, 지방전구세포와 분화된 지방세포를 TNF-, eotaxin, IL-4, IL-5 그리고 leptin으로 처리해보았다. 고지방 식이로 비만을 유도한 쥐에서의 체중 감량에 의한 효과를 확인하기 위해서 C57BL/6 쥐를 26주 동안 고지방 식이 또는 정상 식이로 사육한 뒤, 고지방 식이 유도 비만 쥐 그룹의 절반은 정상 식이로 식이를 바꿔 30주까지 사육하여 체중 감량을 유도했다. 그 후, 각 그룹의 쥐의 정소지방조직, 내장지방조직, 혈청, 폐포세정액에서의 eotaxin 발현 정도를 확인하였다. 그 결과3T3-L1 지방세포에서 지방세포가 분화됨에 따라 eotaxin 발현은 증가하였고, TNF-, eotaxin, IL-4, IL-5, leptin자극에 의하여 eotaxin 발현이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. In vivo 결과는 고지방식이 유도 비만 쥐에서 체중 감량을 시켰을 때 내장지방조직의 eotaxin 발현이 비만인 경우 증가하였다가 체중 감량에 의해 감소함을 보여주었다. 이러한 결과들은 비만과 체중감량이 지방조직의 eotaxin 발현에 영향을 주는 것을 보여주었고, 따라서 간접적으로 천식과도 연관이 있을 가능성을 보여주었다.
more초록/요약
Eotaxin is an important CC chemokine in eosinophil chemotaxis and activation, and thus is implicated in asthma. Recently, obesity is considered to be associated with an increased prevalence of asthma, but the relation between obesity and eotaxin expression has been partially understood in obese mice and human studies. Therefore, we studied the expression patterns of eotaxin in 3T3-L1 preadipocytes/adipocytes and whether eotaxin levels are influenced by body weight gain and/or reduction in diet-induced obese mice. First, we investigated the expression of eotaxin during differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Then we treated 3T3-L1 preadipocytes/adipocytes with TNF-, eotaxin, IL-4, IL-5 and leptin. To examine the effects of weight loss in high-fat diet induced obese mice, we fed C57BL/6 mice with high fat diet or normal diet for 26 weeks, then half of high fat diet group were fed with normal diets until 30 weeks to reduce weight. Epididymal adipose tissues, visceral adipose tissues, serum, bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of mice were examined for the eotaxin expression. The results show that eotaxin expression levels were increased with adipocytes differentiation in 3T3-L1 adipocyte and more eotaxin was expressed when stimulated by TNF-, eotaxin, IL-4, IL-5 and leptin. In vivo study shows that the eotaxin levels were reduced in visceral adipose tissues when high fat diet fed mice underwent weight loss. Taken together, these results indicate a close relation between eotaxin expression and obesity as well as weight loss, thus indirectly show its relation to asthma.
more목차
Abstractⅰ
Contents iv
List of Figures ⅵ
List of Tables ⅶ
I. Introduction 1
II. Materials and Methods
1. Materials 3
2. 3T3-L1 adipocytes culture and treatment of sample 3
3. Mice 4
4. Gene expression analysis in RNA levels
4.1. RNA extraction and cDNA synthesis 4
4.2. Real-time RT-PCR 4
5. Measurement of eotaxin by ELISA 5
6. Statistical analysis 5
Ⅲ. Results
1. Change in eotaxin level during 3T3-L1 adipocyte differentiation 6
2. Change in eotaxin level of preadipocytes due to differentiation media component 8
3. Change in eotaxin level of 3T3-L1 preadipocytes and adipocytes by TNF-stimulation 10
4. Change in eotaxin level of 3T3-L1 adipocytes by recombinant eotaxin treatment 12
5. Change in eotaxin level of 3T3-L1 adipocytes by IL-4 and IL-5 stimulation 13
6. Change in eotaxin level of 3T3-L1 adipocyte by leptin stimulation 15
7. Change in eotaxin level of mice adipose tissue by weight loss in high-fat diet induced obese mice 17
8. Change of eotaxin protein levels in serum and BALF in high-fat diet induced obese and weight loss mice 20
Ⅳ. Discussion 22
Ⅴ. Conclusion 26
Ⅵ. References 27
Acknowledgements 30